جميع الكتب
حول المدرب تسجيل الدخول ابدأ القراءة

الأحياء · المسرد

ما معنى منظومات التعبير؟

تعريف 6.6 الأحياء الجامعية — السنة الثالثة · الفصل 6 — الهندسة الوراثية والتقانة الحيوية

ناقل التعبير يضع المتتالية المشفِّرة المستنسخة تحت مروّج قوي قابل للتحكم من المضيف (مروّج lac أو T7 في E. coli، يحرّضه نظير سكري)، مع موقع ربط ريبوزومي، ومنهٍ، وغالبًا وسم — ستة هستيدينات، أو بروتين صغير — ملحوم بالناتج لتنقيته على عمود. والبكتيريا تصنع غرامات في اللتر من بروتين بسيط (الأنسولين، وهرمون النمو، والإنزيمات) لكنها لا تستطيع غلكزة بروتينات الثدييات المعقدة ولا طيّها؛ والخميرة تضيف سكريات من نوعها هي؛ وخلايا الحشرات والثدييات (وخلايا مبيض الهامستر الصيني هي معيار الصناعة) تصنع الأجسام المضادة وعوامل التخثر مطويةً ومغلكزة كما في الإنسان. والجسم المضاد وحيد النسيلة يصنعه هجين ورمي — خلية B منتجة للأجسام المضادة ملحومة بخلية نقيّية خالدة (كوهلر وميلشتاين، 1975) — أو، اليوم، باستنساخ مورّثات الجسم المضاد في خط تعبير ثديي، حيث يمكن استبدال هيكل الفأر بتسلسل بشري لتجنب الرفض المناعي (الفصل 16).

أمثلة

مثال 6.7 (الأنسولين)

الأنسولين البشري سلسلتان، A (21 بقية) وB (30)، تصلهما روابط ثنائية الكبريت، وتُقطعان في الخلية β\beta من طليعة أنسولين واحدة. وقد عبّرت أول عملية عن السلسلتين منفصلتين في E. coli، كل منهما ملحومة بإنزيم β\beta-غلاكتوزيداز، ثم شُطرتا كيميائيًا ووُصلتا خارج الجسم؛ أما العمليات اللاحقة فتعبّر عن طليعة الأنسولين وتشطرها بالإنزيمات التي يستعملها البنكرياس. ومنذ عام 1996 غُيّر التسلسل نفسه: فإبدال بقية أو اثنتين أو إضافتهما يعطي نظائر تتفكك أسرع (لوجبة) أو تترسب عند موضع الحقن وتُطلق على مدى يوم. فالبروتين الذي كان يقتضي ثماني أطنان من الغدد لكل كيلوغرام يُصنع اليوم في مخمّرة، مطابقًا للبشري أو أفضل منه.

اقرأ في الفصل ←