جميع الكتب
حول المدرب تسجيل الدخول ابدأ القراءة

الأحياء · المسرد

ما معنى إنزيمات القطع، والليغاز، والنواقل؟

تعريف 6.1 الأحياء الجامعية — السنة الثالثة · الفصل 6 — الهندسة الوراثية والتقانة الحيوية

إنزيم القطع من النمط II نوكلياز داخلي بكتيري يقطع DNA المزدوج الطاق عند متتالية بعينها من 4 ⁧إلى⁩ 84\text{ ⁧إلى⁩ }8 أزواج قواعد، متناظرة عادةً: فإنزيم EcoRI يقطع G^{\downarrow}AATTC، تاركًا نتوءات مفردة الطاق من أربع قواعد (نهايات لزجة) متممة لأي نهاية EcoRI أخرى؛ وإنزيمات أخرى تترك نهايات كليلة. وليغاز DNA يختم قطعتين تتوافق نهاياتهما. و الناقل جزيء DNA يتضاعف في مضيف ويستطيع أن يحمل قطعة مقحمة: ومنه البلازميد ذو بضع كيلوقواعد وفيه مَنشأ تضاعف، وواسم انتقائي (مورّثة مقاومة لمضاد حيوي، فلا ينمو على المضاد إلا الخلايا التي التقطت البلازميد) وعنقود من مواقع قطع فريدة للمقحَمة؛ ومنها أيضًا العاثية λ\lambda، والكوزميدات، والصبغيات الاصطناعية البكتيرية أو الخميرية لمقحمات من 20 ⁧إلى⁩ 1000kb20\text{ ⁧إلى⁩ }1000\,\mathrm{kb}. ويدخل DNA البكتيريا عبر التحول، بعد صدمة كيميائية أو كهربائية تجعل الغشاء نفوذًا عابرًا، بكفاءة من 10610^{6} إلى 10910^{9} متحوّل لكل ميكروغرام من البلازميد. والجزيء المؤتلف هو الذي يصل DNA من مصدرين.

ناقل استنساخ وكيمياؤه. يحمل البلازميد منشأً، وواسمًا انتقائيًا، وموقع قطع فريدًا تُوصل فيه قطعة قُطعت بالإنزيم نفسه؛ والنهايات اللزجة تجعل أي قطعتين قطعهما الإنزيم نفسه متوافقتين.
ناقل استنساخ وكيمياؤه. يحمل البلازميد منشأً، وواسمًا انتقائيًا، وموقع قطع فريدًا تُوصل فيه قطعة قُطعت بالإنزيم نفسه؛ والنهايات اللزجة تجعل أي قطعتين قطعهما الإنزيم نفسه متوافقتين.
اقرأ في الفصل ←