جميع الكتب
حول المدرب تسجيل الدخول ابدأ القراءة

الأحياء · المسرد

ما معنى تفاعل البوليميراز المتسلسل؟

تعريف 6.3 الأحياء الجامعية — السنة الثالثة · الفصل 6 — الهندسة الوراثية والتقانة الحيوية

تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) يضخّم قطعة مختارة من DNA بين بادئتين — وهما قليلا نوكليوتيد مركّبان من نحو عشرين قاعدة متممين للطاقين عند طرفي الهدف — عبر دورات من ثلاث درجات حرارة: 95C95\,{}^{\circ}\mathrm{C} لفصل الطاقين، و50 ⁧إلى⁩ 65C50\text{ ⁧إلى⁩ }65\,{}^{\circ}\mathrm{C} لتلاحم البادئتين، و72C72\,{}^{\circ}\mathrm{C} ليستطيلهما بوليميراز ثابت حراريًا (Taq، من بكتيريا الينابيع الحارة Thermus aquaticus). وكل دورة تضاعف عدد نسخ القطعة الواقعة بين البادئتين، فتحوّل ثلاثون دورة جزيئًا واحدًا إلى مليار. وتفاعل PCR مع النسخ العكسي ينسخ RNA أولًا إلى DNA فيقيس النسخ أو فيروسات RNA؛ وتفاعل PCR الكمي (qPCR) يتابع التضخيم في الزمن الحقيقي بصبغ متألق ويقرأ الكمية الابتدائية من الدورة التي تعبر عندها الإشارة عتبةً.

اقرأ في الفصل ←