Biologie · Begrippenlijst

Wat is De polymerasekettingreactie?

Definitie 6.3 Universitaire biologie — jaar 3 · Hoofdstuk 6 — Genetische modificatie en biotechnologie

De polymerasekettingreactie (PCR) vermeerdert een gekozen stuk DNA tussen twee primers — synthetische oligonucleotiden van ongeveer twintig basen, complementair aan de twee strengen aan de uiteinden van het doelwit — via cycli van drie temperaturen: 95C95\,{}^{\circ}\mathrm{C} om de strengen te scheiden, 50 tot 65C50\text{ tot }65\,{}^{\circ}\mathrm{C} om de primers te laten paren, en 72C72\,{}^{\circ}\mathrm{C} om een hittebestendig polymerase (Taq, uit de heetwaterbronbacterie Thermus aquaticus) ze te laten verlengen. Elke cyclus verdubbelt het aantal kopieën van het segment tussen de primers, zodat dertig cycli van één molecuul een miljard maken. De reverse-transcriptie-PCR kopieert eerst RNA naar DNA en meet zo transcripten of RNA-virussen; de kwantitatieve PCR (qPCR) volgt de vermeerdering in reële tijd met een fluorescerende kleurstof en leest de beginhoeveelheid af uit de cyclus waarin het signaal een drempel overschrijdt.

Lees in het hoofdstuk →