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Biologie · পরিভাষা

Dénaturation, température de fusion কী?

অন্য নাম: denaturation (ADN) · temperature de fusion · hybridation

Définition 11.9 Biologie universitaire — 1re année · অধ্যায় 11 — Nucléotides et acides nucléiques

Le chauffage, ou un pH extrême, sépare les deux brins de l’ADN : c’est la dénaturation (ou fusion), une transition coopérative sur quelques degrés, dont le milieu est la température de fusion TmT_m. Elle s’accompagne de l’effet hyperchrome : les brins simples absorbent environ 40 %40\,\% de lumière ultraviolette de plus à 260 nm260\,\mathrm{nm} que les mêmes bases empilées dans une hélice. TmT_m croît avec la teneur en G+CG + C (0.4 ∘C0.4\,{}^{\circ}\mathrm{C} par pour cent), avec la concentration en sel et avec la longueur ; dans un sel à 0.15 mol/L0.15\,\mathrm{mol}/\mathrm{L}, un long ADN à 50 %50\,\% de G+CG + C fond vers 90 ∘C90\,{}^{\circ}\mathrm{C}. Refroidis lentement, les brins retrouvent leurs complémentaires et reforment l’hélice : c’est la renaturation, ou l’hybridation lorsque les brins viennent de sources différentes.

Courbes de fusion de deux ADN dans le même sel. L’absorbance croît de 40\,\% à mesure que les brins se séparent, sur quelques degrés ; le point milieu, T_m, est plus élevé pour l’ADN le plus riche en paires G–C.
Courbes de fusion de deux ADN dans le même sel. L’absorbance croît de 40 %40\,\% à mesure que les brins se séparent, sur quelques degrés ; le point milieu, TmT_m, est plus élevé pour l’ADN le plus riche en paires G–C.
ADN précipité par de l’éthanol froid à partir d’un lysat cellulaire et enroulé sur une baguette de verre : quelques milligrammes de la molécule, visibles sous forme de fibres parce que chacune est longue de millions de paires de bases.
ADN précipité par de l’éthanol froid à partir d’un lysat cellulaire et enroulé sur une baguette de verre : quelques milligrammes de la molécule, visibles sous forme de fibres parce que chacune est longue de millions de paires de bases.

উদাহরণ

Exemple 11.11 (Une sonde trouve un gène)

Une sonde de vingt nucléotides complémentaire d’un gène, à 5 ∘C5\,{}^{\circ}\mathrm{C} sous son propre TmT_m, se lie à son complémentaire exact et à rien d’autre dans trois milliards de paires de bases : un seul mésappariement sur vingt abaisse TmT_m de plusieurs degrés et l’hybride mésapparié fond. La spécificité de l’appariement des bases, multipliée sur vingt positions, est ce sur quoi repose tout test d’ADN, de la recherche de paternité à la détection d’un pathogène.

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