Biologi · Glosarium

Apa itu Enzim restriksi, ligase, dan vektor?

Definisi 6.1 Biologi Universitas — Tahun 3 · Bab 6 — Rekayasa Genetika dan Bioteknologi

Sebuah enzim restriksi tipe II adalah endonuklease bakteri yang memotong DNA beruntai ganda pada urutan tertentu sepanjang 4 sampai 84\text{ sampai }8 pasangan basa, yang lazimnya palindrom: EcoRI memotong G^{\downarrow}AATTC, lalu meninggalkan tonjolan beruntai tunggal berbasa empat (ujung lengket) yang komplementer dengan ujung EcoRI mana pun; enzim lain meninggalkan ujung tumpul. Ligase DNA menutup dua fragmen yang ujungnya berjodohan. Sebuah vektor adalah molekul DNA yang bereplikasi di dalam sebuah inang dan sanggup mengusung fragmen sisipan: sebuah plasmid sepanjang beberapa kilobasa dengan sebuah titik asal replikasi, sebuah penanda terpilih (gen kekebalan antibiotik, sehingga hanya sel yang menyerap plasmidnya yang tumbuh pada antibiotik itu), dan sekelompok tapak restriksi tunggal bagi sisipannya; bakteriofag λ\lambda, kosmid, serta kromosom buatan bakteri atau khamir bagi sisipan 20 sampai 1000kb20\text{ sampai }1000\,\mathrm{kb}. DNA masuk ke dalam sebuah bakteri lewat transformasi, sesudah kejutan kimia atau listrik yang membuat membrannya sejenak dapat ditembus, dengan daya guna 10610^{6} sampai 10910^{9} transforman tiap mikrogram plasmid. Sebuah molekul rekombinan adalah molekul yang menyambungkan DNA dari dua sumber.

Sebuah vektor pengklonan dan kimianya. Plasmidnya mengusung sebuah titik asal, sebuah penanda terpilih, dan sebuah tapak restriksi tunggal, dan ke dalam tapak itu sebuah fragmen yang dipotong enzim yang sama diligasikan; ujung lengket membuat dua fragmen mana pun yang dipotong enzim yang sama saling jodoh.
Sebuah vektor pengklonan dan kimianya. Plasmidnya mengusung sebuah titik asal, sebuah penanda terpilih, dan sebuah tapak restriksi tunggal, dan ke dalam tapak itu sebuah fragmen yang dipotong enzim yang sama diligasikan; ujung lengket membuat dua fragmen mana pun yang dipotong enzim yang sama saling jodoh.
Baca dalam konteks →