De glycolyse is een reeks van tien enzymreacties in het cytosol die één glucose (C6) omzet in twee pyruvaat (C3). In de investeringsfase worden twee ATP uitgegeven om de suiker te fosforyleren (hexokinase, daarna fosfofructokinase, PFK) en wordt het difosfaat met zes koolstoffen in twee fosfaten met drie koolstoffen gesplitst. In de opbrengstfase wordt elke triose door geoxideerd (de enige oxidatie van de glycolyse) en worden haar fosfaten door substraatfosforylering aan ADP overgedragen — een fosfaat dat rechtstreeks van een energierijk tussenproduct aan ADP wordt doorgegeven, zonder membraan of zuurstof. De balans:
Zij heeft geen zuurstof nodig; zij is de oudste en meest algemene route van de stofwisseling.