Restrictie-enzymen, ligase en vectoren কী?

Een restrictie-enzym van type II is een bacterieel endonuclease dat dubbelstrengs DNA knipt op een bepaalde sequentie van $4\text{ tot }8$ basenparen, meestal een palindroom: EcoRI knipt G$^{\downarrow}$AATTC en laat enkelstrengs overhangen van vier basen achter (plakkende uiteinden) die complementair zijn aan elk ander EcoRI-uiteinde; andere enzymen laten stompe uiteinden achter. Het DNA-ligase sluit twee fragmenten waarvan de uiteinden op elkaar passen. Een vector is een DNA-molecuul dat in een gastheer repliceert en een ingevoegd fragment kan dragen: een plasmide van enkele kilobasen met een replicatie-oorsprong, een selecteerbare marker (een gen voor antibioticaresistentie, zodat alleen cellen die het plasmide hebben opgenomen op het antibioticum groeien) en een groepje unieke restrictieplaatsen voor het invoegsel; bacteriofaag $\lambda$, cosmiden, en bacteriële of gistkunstchromosomen voor invoegsels van $20\text{ tot }1000\,\mathrm{kb}$. DNA komt een bacterie binnen door transformatie, na een chemische of elektrische schok die het membraan kortstondig doorlaatbaar maakt, met een doeltreffendheid van $10^{6}$ tot $10^{9}$ transformanten per microgram plasmide. Een recombinant molecuul is er een dat DNA uit twee bronnen samenvoegt.