A replicação começa numa origem — uma no cromossomo bacteriano, dezenas de milhares num genoma eucariótico — em que a hélice é aberta e duas forquilhas de replicação se afastam em sentidos opostos. Em cada forquilha: uma helicase desenrola a hélice (um ATP por par de bases), proteínas de ligação a fita simples mantêm as fitas separadas afastadas, e uma topoisomerase à frente da forquilha alivia a torção que o desenrolamento acumula. A DNA-polimerase acrescenta nucleotídeos apenas à hidroxila de uma cadeia existente, de modo que toda fita nova cresce de e nenhuma consegue começar do nada: uma primase deposita antes um curto iniciador de RNA que a polimerase estende. No molde lido de a fita nova cresce continuamente rumo à forquilha: é a fita contínua. No outro molde a fita nova precisa crescer se afastando da forquilha, em pedaços de nucleotídeos nas bactérias e de nos eucariotos, os fragmentos de Okazaki, cada um com o próprio iniciador: é a fita descontínua. Uma segunda polimerase substitui os iniciadores por DNA e uma ligase sela os fragmentos numa única fita.
Exemplos
Exemplo 18.4 (Velocidade e pontos de partida)
Uma forquilha bacteriana avança pares de bases por segundo: duas forquilhas copiam os da E. coli em e, em meio rico, em que a célula se divide a cada vinte, uma nova rodada começa antes que a anterior termine. Uma forquilha eucariótica, retardada pela cromatina, avança por segundo: copiar um cromossomo humano de a partir de uma única origem levaria um mês, e por isso o genoma é copiado a partir de umas origens em oito horas, numa ordem fixa para cada tipo celular.