La ARN polimerasa sintetiza ARN sobre un molde de ADN, de , a partir de los cuatro ribonucleósidos trifosfato y sin cebador. Empieza en un promotor, una secuencia situada justo aguas arriba del gen que la enzima reconoce y a la que se une; en las bacterias una subunidad llamada (sigma) se encarga del reconocimiento, en dos tramos conservados diez y treinta y cinco pares antes del inicio. La enzima abre unos quince pares de la hélice formando una burbuja de transcripción, copia la hebra molde (leída de ) a un ARN de secuencia idéntica a la otra hebra, la codificante, y avanza a unos cincuenta nucleótidos por segundo mientras vuelve a cerrar la hélice tras de sí; el ARN se desprende a medida que se fabrica. Se detiene en un terminador: en las bacterias, una secuencia autocomplementaria cuyo ARN se pliega en una horquilla que libera el transcrito. Muchas polimerasas pueden seguirse unas a otras a lo largo de un gen, de modo que puede iniciarse un transcrito cada segundo.
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